一、样品要求:
1.最佳检测和分选细胞大小范围:0.2-50um;
2.细胞种类:真核细胞(组织分离细胞、细胞系、血液、骨髓、体液细胞等);
3.进样管:0.5ml、1.0ml、1.5ml、5ml、15ml、50ml规
4.样品要经300目细胞筛过滤;
5.无菌分选时,收集管中需加1ml带有三抗的培养液。
二、建议的细胞浓度:
细胞种类 |
浓度 |
喷嘴 |
Lymphocytes, thymocytes or splenocytes (直径8-12 μm) |
2 ×108/ml |
70μm |
Activated lymphocytes, smaller cell lines (直径12-20 μm) |
1×108/ml |
85 μm |
Large adherent cell line (直径>20 μm) |
2 ×107/ml |
100μm |
三、仪器配置:
1.5根激光器:488nm、640nm、405nm、561nm、355nm,17通道6路分选;
2.滤光片系统:
(1)355Excitation 488/59 620/29 692/75;
(2)405Excitation 488/59 546/20;
(3)488Excitation 513/26 576/21 620/29 664/22 710/45 795/70;
(4)561Excitation 579/16 614/20 692/75;
(5)640Excitation 671/30 722/44 795/70。
四、性能指标:
1、MoFloAstrios EQ光学性能:
(1)双光程增强型前向光散射系统(eFCS)可同时收集前向光散射光信号波长可选(355nm紫外激光除外);
(2)具有S、M、P 3类7种eFCS Mask,及客户自定义Mask可选。所有Mask可两两自由组合7激光—7 Pinhole激发系统,可选激光包括:355nm、405nm、488nm、532nm、561nm、592nm、642nm所有激光信号及散射光由光纤传导(355nm紫外激发光除外)最多可选包含散射光信号内的51个参数的信号(同时采集32个参数信号)所有激光可配置独立的侧向散射光(SSC)收集通道(355nm紫外激光除外)。
2、MoFlo Astrios EQ分选性能:
(1)理论最大分选速度:200,000细胞/秒;
(2)分选纯度:>99% (使用70μm喷嘴在7万每秒的速度,60psi压力,纯化分选模式下分选目的细胞含量1%的样品);
(3)回收率:>理论预计分选细胞的90%;
(4)分选活性:在不同的喷嘴,鞘液和压力下,分选出的培养细胞均可在分选后几天内开始增殖;
(5)有效获取速度:>100000细胞/秒;
(6)有效分选速度:>70000细胞/秒;
(7)CyClone(克隆分选):
(8)板式分选:预设6-1536孔板,用户自定义孔板类型, 分选精细度最高可达250dpi,水浴温度控制,可进行加热或制冷(可选);
(9)管式分选:最高6路分选;
(10)2路分选:1.5, 5, 15, 50 mL样品管接收;
(11)4路分选:4×5 mL,3x5 mL+1x50 mL样品管接收;
(12)6路分选:1.5或5 mL样品管接收 ;
(13)水浴温度控制,可进行加热或制冷(可选);
(14)玻片分选:预设高至1536点,用户可自定义点矩阵类型,分选精细度最高可达250dpi。
五、仪器主要应用:
细胞或其他生物样本分选。